本發明公開了一種可防治豬支原體肺炎的干細胞制劑的制備方法,從初生豬腿骨骨髓中分離豬骨髓間充質干細胞;分離豬骨髓間充質干細胞的亞型細胞BMSC-S3細胞系;建立穩定轉染PBD-1基因的BMSC-S3/PBD-1細胞系;PCR檢測BMSC-S3/PBD-1細胞表達的基因;細胞免疫熒光化學分析和流式細胞術檢測BMSC-S3/PBD-1細胞表達的抗原分子。本發明制備的BMSC-S3/PBD-1細胞穩定表達PBD-1,且具備標準BMSC干細胞特性,將穩定轉染PBD-1基因的BMSC-S3/PBD-1細胞通過耳部靜脈輸注到患支原體肺炎的豬體內,有效劑量為1~5×105/次/kg體重,可以控制豬支原體肺炎疾??;BMSC-S3/PBD-1細胞可以長期在液氮罐中保存,來源有保障,本發明提供的干細胞制劑無耐藥性,外源蛋白為豬體特有,無藥物殘留的風險,應用前景廣闊。
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