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NF-κB檢測雙鏈DNA微陣列芯片及制備

881   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
2023-03-19 07:11:25
本發明在固相支持物(solid substrates)表面制備一種雙鏈脫氧核糖核酸(double-strandedDNA,dsDNA)微陣列(microarray),使其dsDNA探針(probes)上嵌合核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)的序列特異性DNA結合位點(sequence-specific DNA-binding sites),用以高通量檢測(high-throughput detecting)細胞核內NF-κB的含量及篩選dsDNA/NF-κB相互作用干擾性分子(molecules interfering dsDNA/NF-κB interaction)。本發明首先依靠專利技術(中國專利02112780.8及02137945.9)及其它本發明提出的方法,在固相支持物表面制備dsDNA微陣列,使該dsDNA微陣列上的大量dsDNA探針上含有NF-κB的序列特異性DNA結合位點,再將該dsDNA微陣列與特定細胞核蛋白或NF-κB純蛋白雜交結合,通過NF-κ、B與微陣列靶點dsDNA的相互作用,實現對特定細胞核中NF-κB蛋白的定性或定量測定,或通過檢測在外源分子,如組合化學分子、天然生物分子的存在下,NF-κB與微陣列靶點dsDNA相互作用特征的改變,篩選能夠干擾NF-κB與其靶點dsDNA的相互作用的分子,特別是能夠降低NF-κB與其靶點dsDNA結合親合性(binding affinity)的組合化學或天然生物小分子。本發明制備的NF-κB檢測dsDNA微陣列芯片,在基礎分子生物學研究,特別是NF-κB相關基因表達調控和生物醫學研究,如NF-κB相關疾病藥物作用機理研究和藥物性分子篩選中有廣泛而重要的應用價值。
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