本發明公開了一種基于磷酸鹽柱[5]芳烴測定T4多聚核苷酸激酶活性的電化學分析方法,包括如下步驟:以磷酸鹽柱[5]芳烴PP5作為主體,亞甲基藍MB作為客體分子,利用二氧化鈦TiO2的介導作用,構建了一種電化學生物傳感器用于T4PNK活性檢測;設計的DNA底物鏈通過形成金?硫鍵固定在金電極表面,當存在ATP和T4PNK時,DNA底物鏈末端?OH被磷酸化?PO4,以TiO2納米粒子作為介導,將磷酸鹽柱[5]芳烴連接到電極表面,磷酸鹽柱[5]芳烴與亞甲基藍通過主體和客體識別作用發生絡合,實現電化學響應信號放大;產生的電化學信號與T4PNK濃度成正比,實現對T4PNK的高靈敏度和高選擇性測定。
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