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利用枯草芽孢桿菌表達重組胰高血糖素樣肽-1的方法

732   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
2023-03-19 08:56:36
一種利用枯草芽孢桿菌表達重組胰高血糖素樣肽?1的方法。首先化學合成得到含有BamHⅠ/XbaⅠ酶切位點及His?tag標簽的重組胰高血糖素樣肽?1目的基因片段，插入帶有SamyQ信號肽序列的pHT43載體質粒中，經大腸桿菌DH5α擴增后，篩選陽性克隆，經過測序驗證后，將測序正確的質粒大量抽提，經過電轉化方法導入枯草芽孢桿菌WB800N宿主中，培養并且經過1mM?IPTG誘導表達后，發酵液上清經過Tricine–SDS?PAGE及Western?Blot方法證明重組胰高血糖素樣肽?1（hmGLP?1）的重組蛋白成功獲得表達。本發明通過重組胰高血糖素樣肽?1基因導入腸道益生菌枯草芽孢桿菌中，使之成為能夠表達其蛋白的重組菌，為后續制備活菌制劑和進行動物模型實驗奠定基礎。
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