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大規模提取去除內毒素的質粒的方法

1262   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
2023-03-19 08:20:17
本發明涉及一種大規模提取去除內毒素的質粒的方法,包括先通過經典堿裂解法獲得粗分離的質粒DNA,然后依次加入異丙醇、NH4Ac溶液、RNase?A、NaCl,再加入PEG6000和NaCl的混合溶液,期間使用TE溶液溶解沉淀,通過無水乙醇重新沉淀,通過70%乙醇洗滌沉淀并配合離心操作,干燥后最終用TE溶液溶解沉淀,獲得目的質粒。本發明能很好的去除內毒素對質粒DNA的污染,本發明所使用的所有試劑均為實驗室常備的化學試劑,操作方法簡潔,易于掌控,適合大規模質粒的提取。本發明所獲得的質粒濃度可達5mg/mL,且內毒素低于5EU/μg,質??捎糜诿盖?、DNA序列的測序、細胞轉染、病毒包裝以及臨床動物免疫實驗。
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