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極端嗜酸性氧化亞鐵硫桿菌的無標記基因敲除方法

1015   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
2023-03-17 01:00:01
本發明公開了一種基于同源重組原理的極端嗜酸性氧化亞鐵硫桿菌無標記基因敲除方法,步驟包括初始質粒、含有要敲除靶基因上下游同源片段的自殺質粒和含酵母核酸內切酶I-SceI基因的誘導質粒的構建,自殺質粒和誘導質粒向嗜酸性氧化亞鐵硫桿菌的接合轉移,發生第一次同源重組單交換子和第二次同源重組雙交換突變株的篩選和鑒定。本發明首次實現了嗜酸性氧化亞鐵硫桿菌的無標記基因敲除,能快速、穩定、高效地敲除該菌的基因,不僅可用于該菌基因的功能和代謝機制研究,進行遺傳性狀改造,構建高效浸礦工程菌;而且獲得的突變株不攜帶任何抗性基因,既可以作為出發菌株進行后續不同位點的基因敲除和改造,還可以安全用于大規模工業生產。
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“極端嗜酸性氧化亞鐵硫桿菌的無標記基因敲除方法” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究，如用于商業用途，請聯系該技術所有人。
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